程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的十分困难

循环细胞内( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检古质生物学家”，已在癌症癌症、癌和结直肠癌中会用于病症评分。小细胞内肝癌(Small celllung cancer，SCLC)许多组织古质生物学家来源太少，且依赖必要的系统对对患上重新分配和预测病症的质生物遥相呼应。同类型研究成果者CTCs在SCLC中会的药理学系统对设计的持续发展顺利完成了揭示功能性研究成果，见到CTCs对SCLC的确诊、已确定，系统对对患上、重新分配，评核、病症以及建立表征用药方案等带有关键功能性含意，本文就CTCs在SCLC药理学系统对设计的持续发展中会的研究成果实质性应综述。

一、SCLC病患者CTCs的检查原理

CTCs的检查原理主要有流式细胞内检查系统对设计( fluocytometry，FCM)、PCR一聚合酶链催化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统对、CTC芯片(CTC-chip)系统对设计和膜简而言之复合细胞内系统对设计(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中会CellSearch系统对因其半自动化的操作的平台，较差的抗原、敏感功能性和可重复功能性，踏入最时常系统对设计的持续发展的CTCs检查原理。

早在2004年，Allard等首度系统对设计的持续发展CelISearch依此检查了99实有肝癌（未能列举SCLC实有数）病患者的CTCs，随后Nagrath等使用CTC-chip依此检查了55实有肝癌病患者肺脏胭脂C TCs。2009年之前的研究成果多使用CeIISearch依此检查SCI．C病患者肺脏胭脂CTCs，然而该原理由于对依赖上皮细胞内基本特征的细胞内会消失漏检不太可能，且与病原体磁珠及抗体结合的CTCs无依此言道某些早先的检查，药理学系统对设计的持续发展受到之外。

同类型，随着单晶科技的持续发展，基因表达CTCs表面遥相呼应的抗原识别分f省略的单晶材料结合质流控系统对设计的CTCs检查的平台的研究成果受到普遍注目，2013年，《自然地》（Nature）刊物将CTCs单晶检查选为最具创新功能性和生成潜能的确诊新原理，成果数值得一提。但就迄今来看，现有的CTCs检查原理各有利弊，未能见研究成果推测哪种原理对SCLC的CTCs检查更为有占优。着眼未能来，亟须要开发抗原、敏感功能性更为高的CTCs检查系统对设计，为SCLC的坚实和药理学研究成果带来突破。

二、CTCs在SCLC药理学系统对设计的持续发展中会的研究成果现况

（一）CTCs可用与SCLC的确诊、已确定

同类型多项研究成果显示CTCs可用水准与SCLC的确诊、已确定有融洽关系0 2009年Tanaka等系统对设计的持续发展CeIISearch依此检查了1 50实有7.5ml肺脏胭脂CTCs，其中会肝癌1 25实有、非恶功能性25实有，肝癌病患者仅限于116实有非小细胞内肝癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9实有SCLC。

研究成果得出正确性SCLC病患者CTCs阳功能性率为66.70-/0（6实有／9实有），质小低于NSCLC病患者的CTCs阳功能性率(癌25.9%，鳞癌40.9%；癌对比SCLC，P

同年，Hou等系统对设计的持续发展CeIISearch依此检查了50实有初治的SCLC病患者肺脏胭脂CTCs，仅限于20实有之外期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患者和30实有普遍期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患者，弧期ED-SCLC及LD-SCLC病患者的中会位CTCs可用大致相同237和2个/7.5ml胭脂，7实有未能已确定CTCs的病患者仅为LD-SCLC，验证CTCs可用水准与SCLC已确定相关。

相似的正确性在2012年被日本帝国学者Naito等推测，研究成果者在51实有SCLC病患者缄默用CeIISearch依此检查弧期CTCs水准，得出正确性ED-SCLC,病患者的中会位CTCs可用为9.5个f 7.5ml胭脂，而LD-SCLC仅为1个／7.51111胭脂，必要性验证ED-SCLC病患者的CTCs水准低于LD-SCLC病患者。

（二）CTCs评核SCLC的及病症

CTCs有否可作为评核SCLC和病症的有救仅指f,匙研究成果者们一直在探讨的缺陷。Houi等在2009年通过CellSearch依此检查了50实有SCLC病患者(LD-SCLC20实有，ED-SCLC30实有)的CTCs，见到CTCs>300个/7.5ml胭脂的病患者及CTCs

弧期CTCs>=50和

在该研究成果中会SCLC病患者的病症下定义数值旧版8个/7.5ml胭脂，以此将病患者分别为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年举例来说系统对设计的持续发展CellSearch依此检查59实有SCLC病患者在弧期、1心率患上后及4心率患上终止后外固胭脂CTCs水准，其中会ED-SCLC病患者38实有，LD-SCLC病患者2 1实有c弧期有43实有病患者(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml胭脂，CTCs>215个/7.5ml胭脂和CTCs

经过1心率患上后病患者CTCs水准质小降低，且1心率患上后CTCs

研究成果者应为CTCs水准是SCLC病症的独立影响变异，其中会1心率患上后CTCs水准是SCLC和病症最强的预测变异。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究成果中会，研究成果者尝试在155实有ED-SCLC中会加入基因表达用药，并对其中会123实有病患者弧期CTCs顺利完成检查，得出正确性基因表达用药未能能该线ED-SCLC病患者的PFS和OS，但见到弧期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml胭脂的mPFS大致相同4.4和4.3个年底（P=0.07），OS大致相同10.7和7.2个年底(P=0.01)。研究成果者普遍认为虽然基因表达用药没能提高ED-SCLC病患者的PFS和OS，但却见到了CTCs不太可能是SCLC病患者的病症遥相呼应。

除此以外，Igawa等尝试系统对设计的持续发展OBP-401试验车检查SCLC病患者肺脏胭脂CTCso系统对设计的持续发展OBP-401试验车检查癌症和胃癌病患者CTCs的相关研究成果已有前期刊文。研究成果确立30实有韧治的SCLC病患者，29实有病患者(96%)肺脏胭脂CTCs阳功能性。在弧期，21实有病患者CTCs

（三）CTCs系统对对SCLC的患上和重新分配

现有的研究成果表明通过检查CTCs的消失来系统对对SCLC的患上和重新分配带有关键功能性的药理学含意o Tanaka等研究成果见到CTCs水准‘j 125实有肝癌病患者（仅限于9实有SCLC病患者）实质性质小相关，特别是与恰好重新分配融洽（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，所写普遍认为CTCs可作为系统对对肝癌恰好重新分配的质生物标记物。Natio等研究成果见到SCLC在弧期、用药终止后及患上后CTCs的阳功能性率大致相同68.6%、26.5%和67.6，示意SCLC患上后肺脏学CTCs水准升高，暴发恰好重新分配肺脏的比实有为0、1和>=2的病患者其中会位CTCs可用大致相同2.0、7.5和21个/7.5ml胭脂,示意CTCs水准与恰好重新分配肺脏的比实有有关，恰好重新分配得越多，CTCs可用得越少（p

三、CTCs在SCLC药理学系统对设计的持续发展中会的揭示方向

患上和重新分配是所致病患者用药收场和死亡的主要原因，及时见到的患上和重新分配并采敢积极必要的用药措施可质小提高病患者预后。然而，由于SCLC依赖很难系统对对患上和重新分配的质生物遥相呼应，且时常规的测试检查无依此见到质重新分配灶及比较多残留病灶，所致暴发患上和重新分配的SCLC病患者不必及时拒绝接受确诊和用药。

药理学中会以外LD-SCLC的病患者病症相异较多，示意有些之外期的病患者在确诊时不太可能已暴发了的测试不必见到的质重新分配而踏入潜在的普遍期病患者。通过检查肺脏胭脂CTCs的消失及比实有叠加从而对SCLC病患者精子情况下顺利完成实时、实时地系统对对和评分，及时见到的患上、重新分配，将有助于药理学护士对用药急于的认清和用药战略的举例来说，但其实CTCs的比实有或叠加数值为多少时很难精确反映SCLC的患上或重新分配尚为不明确，很难更为多的循证医学证据应支持者。

CTCs在评核SCLC病患者用药太少之处的系统对设计的持续发展尚为处于揭示期中，用药过程中会CTCs比实有的叠加与SCLC病患者患上的连续功能性及其与SCLC病患者放疗急于的举例来说等缺陷在未能来须要大量的药理学研究成果。近5年，对CTCs有否可作为SCLC病患者病症仅指标的研究成果逐渐增多，但SCLC最佳的病症CTCs下定义数值尚为无存疑，争议时有。

其中会3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究成果将SCLC的病症CTCs畀定数值分别旧版为50、8和2个／7.5ml胭脂，相异不小，这不太可能与研究成果使用的统计学原理不尽相同以及入组样本量较少有关。同类型意大利学者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病患者隔开研究成果，对弧期、l心率患上后CTCs以及用药前后CTCs的叠加数值分别旧版病症下定义数值，为未能来的研究成果获取了新的思路。笔者所在的科研的团队也时是致力于我国SCLC病患者病症最佳CTCs下定义数值的研究成果，结果令人所想。

的表征用药是用药模式的持续发展方向。SCLC病患者对患上药品的催化存在质小的个体相异，其主要原因不太可能与复杂的异质功能性、基因表达相异及多态功能性有关。所以，逐步含蓄SCLC的遗传物质学基本特征对付诸真时是含意上的SCLC表征用药尤为关键功能性。同类型我国学者王洁等研究成果执依此人员通过系统对设计的持续发展单细胞内基因分子质生物学手段对病患者单个CTC顺利完成以外遗传物质、核苷酸遗传物质分子质生物学。

在此项研究成果中会，谢晓亮教授所制造的多重退火和环化循环的逐次系统对设计(MAIBAC)，最终付诸了对病患者肺脏胭脂单个CTC的以外遗传物质逐次和深度分子质生物学，在单个细胞内水准测量以外遗传物质基因拷贝数变异(CNVs)和单蛋白质变异(SNVs)o单细胞内水准CTCs遗传物质分子质生物学系统对设计可及时获取如耐药功能性基因突变等表征用药所须要的关键功能性反馈，同时也为未能来SCLC基因表达药品的开发获取系统对设计支持者。

SCLC许多组织古质生物学家难以换取，约束了早先各项的测试研究成果的开展，而利用CTCs构建的SCLC循环细胞内移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)数学模型，年底内解决这一棘手难题。除此以外，Hodgkinson等尝试将6实有ED-SCLC病患者lOml肺脏胭脂中会的CTCs提取后注射到病原体缺陷人体内皮下，结果在4只人体内身上逐步形成了CDXs，验证SCLC病患者的CTCs带有致瘤功能性。

同时系统对设计的持续发展CelISearch依此检查这6实有SCLC病患者的CTCs，得出正确性最终逐步形成CDXs的4实有病患者的CTCs可用仅>400个／7.5ml胭脂，而另外2实有未能逐步形成CDXs的病患者其CTCs可用大致相同222和20个／7.5ml胭脂，示意SCLC的CTCs致瘤功能性与肺脏胭脂CTCs教量有关。必要性量化见到相较于患上敏感功能性SCLC，患上耐药功能性功能性SCLC病患者的CDXs倍增等待时间短、落叶更为迅速。对3实有CDXs给予顺铂和依托泊苷患上药品，其敏感功能性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病患者的OS大致相同9.7.3.5.0.9个年底，示意对CDXs顺利完成灌注药敏试验车可以间接催化病患者猎食等待时间。

该研究成果显示以外SCLC的肺脏胭脂CTCs带有干细胞内特功能性，可顺利完成灌注培养、逐步形成与原发高度相似的CDXs，为SCLC病患者的灌注药敏试验车、耐药功能性机制量化等一系列的测试研究成果获取了供给的许多组织，解决了SCLC病患者古质生物学家来源太少的缺陷。

正确性

从现言道的研究成果可以窥见，虽然CTCs在SCLC中会的药理学系统对设计的持续发展仍处于揭示期中，但前景广阔。迄今，诸多生最终能性研究成果时是在顺利完成中会，相信随着研究成果的不断深入，CTCs年底内踏入SCLC的突破口，所想CTCs在SCLC的领域中会为我们带来惊喜。

编辑： 雪